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培养基琼脂粉出现不凝固现象的因素

发布时间: 2021-12-04  点击次数: 1946次
   培养基琼脂粉一般为白色、淡黄色或淡灰色粉末状,在冷水中不溶解,加热煮沸或高压灭菌可使琼脂溶解,冷却后可凝成固态,反复加热和冷却虽然可以使琼脂在液态和固态多次转换,但琼脂的凝胶强度会越来越低。外观白而没有光泽,杂质含量高,透明度很差(浓度的水溶液溶解后,可发现大量的水中不溶物)。如果用冷水或温水浸泡30分钟左右,它很快就吸水膨胀复原,而真琼脂没有这种现象。

  培养基琼脂粉的使用注意事项:
  1、溶解干粉时,建议水温在40℃以下,最高不超过60℃。琼脂在遇到热水时,表面易吸水变硬,结成硬块,不利于分散溶解。因此在进行干粉溶解时,宜用冷水,并不停搅拌至分散均匀无团块,再进行加热处理;
  2、灭菌前需进行加热煮沸使琼脂完全溶解,分散均匀,方可进行分装试管或锥形瓶,否则分装后可能出现琼脂分布不均,凝固性不一;灭菌前的加热煮沸溶解同时有助于加快高压灭菌过程的热穿透,提高灭菌效果,降低灭菌失败的几率;
  3、已凝固的培养基不可以再次高温高压灭菌。若培养基内成分较稳定,可重新沸水浴溶化一次使用;
  4、需添加抗生素或其他不稳定成分的培养基,需在临用前,待培养基冷却至50-55℃时加入,过早或过热时加入这些成分,易导致不稳定成分分解,降低培养基使用效果;
  5、已凝固的培养基不可反复多次加热溶化使用。反复加热易使培养基内营养成分分解,琼脂的凝胶强度下降,一般成分较稳定的培养基允许溶化一次使用。
  6、已凝固的培养基,不可在结冰条件下保存。培养基结冰会使琼脂内部结构破坏,导致失水或凝固性变差,琼脂变性。

  培养基琼脂粉不凝固的因素:
  1、培养基PH值过低,偏酸,水解。
  2、所加琼脂量不够,增加用量。搅拌不均匀,倒板前没有充分摇匀,凝固不均匀。
  3、琼脂质量不过关,琼脂条在使用时添加量要稍微高一点,琼脂粉是不是新买的。
  4、灭菌温度过高,加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度。
  5、培养基没有加热溶解够不够,就没有凝固。是不是琼脂加错了,营养琼脂不会凝固。


培养基琼脂粉

 

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